2012年5月13-19日，云南省現(xiàn)代農(nóng)業(yè)奶牛產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系奶牛疾病研究室崗位專家楊仕標(biāo)研究員、成員趙文華副研究員、高華峰副研究員和李富祥助理研究員等應(yīng)邀對(duì)云南省一家烏骨種羊場(chǎng)完成全群羊布氏桿菌病血清學(xué)和羊傳染性胸膜肺炎病原學(xué)監(jiān)測(cè)。

1、羊布氏桿菌病血清學(xué)監(jiān)測(cè)

（1）樣品采集：在該烏骨種羊場(chǎng)采集全群全血106份，分離血清。

（2）檢測(cè)方法：應(yīng)用英國(guó)Veterinary Laboratories Agency公司生產(chǎn)的COMPE ELISA試劑盒進(jìn)行檢測(cè)。

（3）檢測(cè)結(jié)果：上述共計(jì)106份血清全部為羊布氏桿菌病抗體陰性。

2、羊傳染性胸膜肺炎病原學(xué)監(jiān)測(cè)

（1）樣品采集：以該場(chǎng)全群羊以個(gè)體為單位，采集咽棉拭子樣品106份。

（2）試驗(yàn)方法：應(yīng)用TakaRa抽提DNA試劑盒抽提樣本DNA，首先將106份樣品制成22個(gè)基因池，分別對(duì)各基因池進(jìn)行PCR檢測(cè)。羊傳染性胸膜肺炎病原核酸檢測(cè)采用標(biāo)準(zhǔn)PCR方法，反應(yīng)條件如下：

（3）檢測(cè)結(jié)果：陽(yáng)性對(duì)照擴(kuò)增出約540bp片段，與預(yù)期結(jié)果548bp相符合，陽(yáng)性對(duì)照成立，試驗(yàn)結(jié)果可以接受�；�因池6、12和15擴(kuò)增出大小與預(yù)期符合的極弱DNA條帶，其它基因池?cái)U(kuò)增呈陰性。對(duì)基因池6、12和15對(duì)應(yīng)的樣品分別進(jìn)行單個(gè)樣品DNA抽提、PCR檢測(cè)，未擴(kuò)增出特異片段，為山羊肺炎支原體核酸陰性。

（4）檢驗(yàn)結(jié)論：所有檢測(cè)樣品均為羊傳染性胸膜肺炎DNA陰性。

通過該項(xiàng)檢測(cè)，為該種羊場(chǎng)羊布氏桿菌病和羊傳染性胸膜肺炎控制、凈化提供技術(shù)支持，保障養(yǎng)殖人員公共衛(wèi)生安全。